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【含量測(cè)定】 氮 取本品0.1g,精密稱(chēng)定,照氮測(cè)定法(通則0704)測(cè)定,計(jì)算,即得。 磷 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取經(jīng)105℃干燥至恒重的磷酸二氫鉀對(duì)照品0.0439g,置50ml量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取10ml,置50ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻(每1ml相當(dāng)于0.04mg的磷)。 供試品溶液的制備 取本品約0.15g,精密稱(chēng)定,置凱氏燒瓶中,加硫酸20ml與硝酸50ml,緩緩加熱至溶液呈淡黃色,小心滴加濃過(guò)氧化氫溶液,使溶液褪色,繼續(xù)加熱30分鐘,冷卻后,轉(zhuǎn)移至100ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻。 測(cè)定法 精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2ml,分別置50ml量瓶中,各依次加入鉬酸銨硫酸試液4ml,亞硫酸鈉試液2ml與新鮮配制的對(duì)苯二酚溶液(取對(duì)苯二酚0.5g,加水適量使溶解,加硫酸1滴,加水稀釋至100ml)2ml,用水稀釋至刻度,搖勻,暗處放置40分鐘,照紫外-可見(jiàn)分光光度法(通則0401),在620nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度,計(jì)算含磷(P)量,即得。 磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺 照液相色譜法(通則0512)測(cè)定。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用硅膠為填充劑(色譜柱Alltima Sillica,250mm×4.6mm,5μm或效能相當(dāng)?shù)纳V柱),柱溫為40℃;以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05)為流動(dòng)相A,以正己烷-異丙醇-流動(dòng)相A(20∶48∶32)為流動(dòng)相B;流速為每分鐘1ml;按下表進(jìn)行梯度洗脫;檢測(cè)器為蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(參考條件:漂移管溫度為72℃;載氣流量為每分鐘2.0L)。 取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰膽堿對(duì)照品各適量,用三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解并稀釋制成每1ml中含上述對(duì)照品分別為50μg、100μg、100μg、200μg、200μg的混合溶液,取20μl注入液相色譜儀,各成分按上述順序依次洗脫,各成分分離度應(yīng)符合要求,理論板數(shù)按磷脂酰膽堿峰、磷脂酰乙醇胺峰與磷脂酰肌醇峰計(jì)算均不低于1500。 測(cè)定法 取磷脂酰乙醇胺和大豆磷脂酰膽堿對(duì)照品各適量,精密稱(chēng)定,加三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解并定量稀釋制成每1ml中含大豆磷脂酰膽堿分別為50μg、100μg、150μg、200μg、300μg、400μg,含磷脂酰乙醇胺分別為5μg、10μg、15μg、20μg、30μg、40μg的溶液,作為對(duì)照品溶液。精密量取上述對(duì)照品溶液各20μl注入液相色譜儀中,記錄色譜圖,以對(duì)照品溶液濃度的對(duì)數(shù)值與相應(yīng)的峰面積對(duì)數(shù)值計(jì)算回歸方程;另精密稱(chēng)取本品約15mg,置50ml量瓶中,加三氯甲烷-甲醇(2∶1)溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。精密量取供試品溶液20μl注入液相色譜儀中,記錄色譜圖。由回歸方程計(jì)算磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺的含量,即得。 【類(lèi)別】 口服用藥用輔料,乳化劑,增溶劑等。 【貯藏】 密封、避光,低溫(-18℃以下)保存。