透明(56-60度恒溫箱) 為了使石蠟浸入到組織塊內(nèi),必須經(jīng)過一種既能與脫水劑混合,又能與石蠟相溶的媒介物質(zhì),這個(gè)過程稱透明。 目前{zh0}的透明劑是二甲苯,在常溫下,如果不是時(shí)間過長(超過24小時(shí)以上)二甲苯并不會引起組織過份發(fā)脆,相反會使某些組織結(jié)構(gòu)比較質(zhì)韌的組織:比如子宮肌瘤等相當(dāng)好切),但是當(dāng)二甲苯溫度超過40℃以后,極易引起組織發(fā)脆。 5、透蠟(56-60度恒溫箱中) (4-5步驟)80%酒精(≤1h)→→95%酒精(≈1h)→→{bfb}酒精(1)(2)(45-100min)→→1/2二甲苯+1/2酒精(30min)→→二甲苯(35min+30min)→→1/2二甲苯+1/2蠟(45min)→→蠟(1)(2)(1-2h) 6、bao埋
顯示葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性的鉛法:
(Glucosel-phosphate phosphohydrolase)
①酶的定位及其生物學(xué)意義:
該酶主要位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng),是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的標(biāo)志酶。G-6-Pase參與糖謝,能水解葡萄糖-6-磷酸而釋放出葡萄糖和磷酸。
⑵原理:G-6-Pase將底物(葡萄糖-6-磷酸鉀鹽)水解產(chǎn)生磷酸離子,后者被孵育液中的硝酸鉛所捕獲,最終反應(yīng)物為顆粒狀的硫化鉛沉淀,其反應(yīng)式如下:
酶Pb(NO3)2
葡萄糖-6-磷酸鉀+H2O葡萄糖+磷酸
⑶結(jié)果:酶活性部位呈棕色硫化鉛顆粒沉淀。在光鏡下G-6-Pase活性顆粒較均勻地分布于胞質(zhì)中。
bao埋在進(jìn)行石蠟bao埋時(shí),先將熔化的石蠟倒入bao埋模具內(nèi),再用加熱的鈍頭鑷子輕輕夾取已浸過蠟的組織塊,將組織塊{zd0}面或特別指定的組織面向下埋入融蠟中,平整地放置于bao埋模具底面中的中央處,用鑷子輕輕壓平,同時(shí)將與組織塊有關(guān)的編號緊貼于該組織塊的旁邊。待bao埋模具內(nèi)的熔蠟表面凝固后,即將模具放入冷水中,以加速熔蠟?zāi)?。石蠟充分凝固變硬后,從bao埋模具內(nèi)取出凝固的蠟條,按組織塊大小切開,把組織塊邊緣部多余石蠟切掉(組織塊周圍保留1-2mm蠟邊為宜),將bao埋蠟塊修整成為規(guī)則的正方形或長方形。