Phosphatas蛋白酶抑制劑混合片-Phosphatas蛋白酶抑制劑
蛋白酶抑制劑混合片劑,鋁箔泡罩包裝 cOmplete ULTRA Tablets, Mini
用于在哺乳動(dòng)物、xj、酵母或植物細(xì)胞的細(xì)胞裂解過程中抑制蛋白酶作用。每片可應(yīng)用于10 ml提取溶液的蛋白酶抑制。
1.1 機(jī)理描述
在細(xì)胞裂解和純化過程中,靶蛋白可能會(huì)被細(xì)胞中tr存在的蛋白
酶分解。綜合了7種強(qiáng)大的蛋白酶抑制劑組分,不含EDTA的
cOmplete ULTRA迷你片劑可有效抑制各種蛋白酶,保護(hù)靶蛋白全
長序列和維持完整的結(jié)構(gòu)。該片劑不含EDTA,能讓對(duì)金屬有依賴
的蛋白保持穩(wěn)定,功能不受影響。
而另一種規(guī)格的cOmplete ULTRA迷你片劑,則含有8種組分,包含
了EDTA對(duì)金屬蛋白酶的抑制作用。
cOmplete ULTRA迷你片劑(EDTA-free)針對(duì)源自酵母、大腸桿菌
和多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞系(如 HEK-293和CHO)的裂解液進(jìn)行了優(yōu)
化,能在各種細(xì)胞類型的裂解液中保護(hù)蛋白,不受到所有這些裂解
液中的絲氨酸、半胱氨酸和天冬氨酸蛋白酶的影響。
不含EDTA的cOmplete ULTRA迷你片劑同時(shí)含有不可逆和可逆性
質(zhì)的蛋白酶抑制劑。其對(duì)金屬蛋白酶無抑制作用。
內(nèi)含物
30 個(gè)獨(dú)立包裝的不含EDTA的cOmplete ULTRA迷你片劑,鋁箔泡罩
包裝。每片可應(yīng)用于10 ml提取溶液的蛋白酶抑制。
1.2 穩(wěn)定性
?將片劑干燥保存在+2至+8°C下,可保存至標(biāo)簽上的有效期。
?2 x水儲(chǔ)液可在+2至+8°C下穩(wěn)定保存4周,在-15至-25°C下至少可保
存4周。
1.3 應(yīng)用
可用于抑制xj、酵母、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞裂解液中的絲氨酸、
半胱氨酸和天冬氨酸蛋白酶。
不含EDTA的cOmplete ULTRA迷你片劑含有可逆的蛋白酶抑制劑
組分。因此要達(dá)到{zj0}的蛋白保護(hù)效果,我們建議可在每個(gè)實(shí)驗(yàn)步
驟后持續(xù)加入片劑進(jìn)行最嚴(yán)格的蛋白酶抑制。
該片劑與 cOmplete ULTRA 迷你片劑的組分相同,{wy}不同在于不含
EDTA或其他金屬螯合劑。
2.2 直接與裂解液一起使用
一片不含EDTA的cOmplete ULTRA迷你片劑足夠抑制10 ml細(xì)胞裂
解液中的蛋白酶水解活性??芍苯訉⑵瑒┨砑拥郊?xì)胞裂解液(或蛋
白純化溶液)中。
若樣品的蛋白酶水解活性很高,可在10 ml裂解液中加入2 片。
2.3 制備儲(chǔ)液(2 倍濃縮)
除了直接加入裂解液使用外,還可以將片劑溶解制備成2倍濃縮的
儲(chǔ)液,步驟如下:
?在PE或PP管中的 5 ml 雙蒸水中加入一片不含EDTA的cOmplete
ULTRA 迷你片劑 。
?渦旋混勻3分鐘,或直到片劑wq溶解。
?儲(chǔ)液即可使用。有時(shí)溶液中可見極細(xì)小的顆粒,這些顆粒對(duì)片劑
的抑制性能無任何影響,即可使用。
?該儲(chǔ)液保存在+2 至 +8°C下可穩(wěn)定放置4周,在-15至-25°C下至少
穩(wěn)定保存4周。
?在長時(shí)間保存2倍儲(chǔ)液后,顆??赡軙?huì)沉淀。在使用前快速渦旋混
勻即可。
3.1 質(zhì)量控制
每個(gè)批次產(chǎn)品的蛋白酶抑制活性都利用濃縮胰腺提取物以及蛋白
酶K、胰蛋白酶和嗜熱菌蛋白酶(本產(chǎn)品無法抑制的金屬蛋白酶)
進(jìn)行測試。使用通用蛋白酶底物(試鹵靈標(biāo)記的酪蛋白)加入上述
各蛋白酶溶液后一小時(shí)測定,核定產(chǎn)品的蛋白酶抑制效果。
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