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犬用凍精稀釋液 狗精子冷凍稀釋
稀釋液的準備:
1.先把犬凍精生產(chǎn)用的A和B液回暖到室溫;
2.按體積的20%,加新鮮蛋黃到A液體和B液中(比如4毫升蛋黃到20毫升瓶的A液;2毫升蛋黃到10毫升瓶的B液);
3.手搖把內含液混勻;
4.把A液保存在室溫,用于步驟1;
5.把B液瓶冷卻到+4°C,用于步驟2;
6.只用富含精子的精液部分來生產(chǎn)凍精。
沖洗:
1.如果收集的精液混有前列腺液,先按1份原精加3-5份A液稀釋,然后在700g重力下離心10-15分鐘;
2.丟棄上清液;
3.小心緩慢地用A恢復到富含精子的體積(根據(jù)以往經(jīng)驗,2-3毫升),混勻(重組精液)。
冷凍操作:
步驟1:*對每份原精(或重組精液),對等緩慢加1份A液,降溫到+4°C。
*通常保存在+4°C至少兩個小時。
步驟2:*對+4°C保存后的混合精液,用1到3分鐘慢慢加B液(也在+4°C),加入B液的量同原始富含精子的體枳相等。
*在+4°C下填充預冷卻的細管并封口。
*繼續(xù)在+4°C保存60分鐘。
*把細管放在液氮面上方5厘米處至少20分鐘后再整個沉浸到液氮中。
解凍:
1.細管在+38°C解凍1分鐘;
2.把解凍的精液合并到一試管中,添加等量事先預溫到+38°C精液。
3.立即做子宮內或開腔犬人工授精。